II型肺泡上皮細(xì)胞是肺泡內(nèi)壁的重要功能細(xì)胞，呈立方或圓形，表面有微絨毛，特征是胞質(zhì)含有嗜鋨性板層小體。其主要功能包括合成和分泌肺表面活性物質(zhì)以降低肺泡表面張力、維持肺泡穩(wěn)定性，以及在肺泡損傷時(shí)增殖分化為I型細(xì)胞參與上皮修復(fù)。作為肺泡的干細(xì)胞，它在維持肺穩(wěn)態(tài)及肺纖維化等疾病發(fā)生中起關(guān)鍵作用。

Name: II型肺泡上皮細(xì)胞
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II型肺泡上皮細(xì)胞

II型肺泡上皮細(xì)胞（Type II Alveolar Epithelial Cells，AEC II），是來(lái)源于哺乳動(dòng)物肺組織的肺泡上皮細(xì)胞亞群，為貼壁生長(zhǎng)型細(xì)胞，是肺泡上皮的主要功能細(xì)胞之一，也是肺組織穩(wěn)態(tài)維持、損傷修復(fù)及肺部疾病發(fā)生發(fā)展的核心細(xì)胞。該細(xì)胞核心功能是合成、分泌肺泡表面活性物質(zhì)（PS），降低肺泡表面張力，防止肺泡塌陷，同時(shí)具備自我更新及分化為I型肺泡上皮細(xì)胞的能力，是肺損傷后肺泡修復(fù)的關(guān)鍵種子細(xì)胞。

檢測(cè)原理

該細(xì)胞的核心檢測(cè)是細(xì)胞特異性鑒定、活性檢測(cè)、純度檢測(cè)及無(wú)污染驗(yàn)證，結(jié)合細(xì)胞生物學(xué)、免疫組織化學(xué)及分子生物學(xué)檢測(cè)方法，確保細(xì)胞系的真實(shí)性、功能性與穩(wěn)定性，具體原理如下：一是細(xì)胞特異性鑒定，采用免疫細(xì)胞化學(xué)（ICC）或Western Blot法，檢測(cè)細(xì)胞特異性標(biāo)志物（如表面活性蛋白SP-A、SP-B、SP-C、SP-D及細(xì)胞角蛋白CK7）的表達(dá)，確認(rèn)細(xì)胞身份，排除其他肺組織細(xì)胞（如I型肺泡上皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞）污染；二是細(xì)胞活性檢測(cè)，采用臺(tái)盼藍(lán)染色法，利用活細(xì)胞細(xì)胞膜完整、不被臺(tái)盼藍(lán)染色，死細(xì)胞細(xì)胞膜破損、被染成藍(lán)色的特性，計(jì)數(shù)活細(xì)胞比例，評(píng)估細(xì)胞活性；三是細(xì)胞純度檢測(cè)，通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)SP-A、SP-C等特異性標(biāo)志物的陽(yáng)性表達(dá)率，確保細(xì)胞純度≥95%，排除雜細(xì)胞污染；四是污染檢測(cè)，采用微生物培養(yǎng)法檢測(cè)細(xì)菌、真菌污染，PCR法檢測(cè)支原體污染，確保細(xì)胞無(wú)外源污染，保障實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性；五是功能驗(yàn)證，檢測(cè)細(xì)胞分泌肺泡表面活性物質(zhì)的能力，通過(guò)油紅O染色觀察細(xì)胞內(nèi)脂滴（表面活性物質(zhì)儲(chǔ)存場(chǎng)所），確認(rèn)細(xì)胞具備正常生理功能。

產(chǎn)品特點(diǎn)

本產(chǎn)品針對(duì)肺部相關(guān)科研實(shí)驗(yàn)需求優(yōu)化制備，兼具特異性、功能性與實(shí)用性，核心特點(diǎn)如下：1. 功能特性完整，完整保留體內(nèi)該細(xì)胞的核心功能，可正常合成、分泌肺泡表面活性物質(zhì)，具備自我更新及向I型肺泡上皮細(xì)胞分化的潛能，適配肺部損傷修復(fù)相關(guān)研究；2. 特異性強(qiáng)，高表達(dá)SP-A、SP-B、SP-C、SP-D等該細(xì)胞特異性標(biāo)志物，細(xì)胞純度高，無(wú)其他肺組織雜細(xì)胞污染，可特異性用于肺部疾病機(jī)制研究；3. 生物學(xué)特性穩(wěn)定，原代細(xì)胞可體外短期穩(wěn)定培養(yǎng)，永生化細(xì)胞可長(zhǎng)期傳代培養(yǎng)，經(jīng)多代傳代后仍能保留其典型生理功能及標(biāo)志物表達(dá)，染色體核型穩(wěn)定（永生化細(xì)胞），無(wú)明顯變異，保障實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的一致性；4. 細(xì)胞活力高，產(chǎn)品出廠前經(jīng)嚴(yán)格篩選，原代細(xì)胞活力≥90%，永生化細(xì)胞活力≥95%，代次控制在適宜范圍，復(fù)蘇后存活率高，可快速適應(yīng)體外培養(yǎng)環(huán)境；5. 無(wú)外源污染，經(jīng)嚴(yán)格QC檢測(cè)，確保無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體及無(wú)關(guān)病毒污染，提供完整檢測(cè)報(bào)告，包含細(xì)胞特異性鑒定及功能驗(yàn)證數(shù)據(jù)；6. 適配性廣，可兼容DMEM/F12、RPMI 1640等多種培養(yǎng)基，支持貼壁培養(yǎng)，適配肺部疾病機(jī)制、藥物毒理學(xué)、肺泡表面活性物質(zhì)代謝、肺損傷修復(fù)等多種科研實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景；7. 實(shí)用性強(qiáng)，可直接用于實(shí)驗(yàn)，無(wú)需額外進(jìn)行細(xì)胞分離純化操作，廠家提供全程技術(shù)指導(dǎo)，包括細(xì)胞復(fù)蘇、培養(yǎng)、傳代及功能檢測(cè)相關(guān)操作，降低實(shí)驗(yàn)門(mén)檻；8. 來(lái)源可靠，細(xì)胞均源自健康哺乳動(dòng)物肺組織（可按需提供人源、鼠源等不同來(lái)源），分離培養(yǎng)流程標(biāo)準(zhǔn)化，確保細(xì)胞質(zhì)量均一。

適用樣本類型

本產(chǎn)品為細(xì)胞成品（原代或永生化），適配各類肺部相關(guān)科研實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景，可直接用于相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作，其對(duì)應(yīng)的原代樣本來(lái)源及成品細(xì)胞適用的實(shí)驗(yàn)樣本形式如下：原代樣本來(lái)源為健康哺乳動(dòng)物（人、小鼠、大鼠等）肺組織，經(jīng)yi酶消化、梯度離心等方法分離純化后，培養(yǎng)獲得原代細(xì)胞；永生化細(xì)胞由原代細(xì)胞經(jīng)基因改造（如SV40病毒轉(zhuǎn)化）獲得，可長(zhǎng)期傳代。成品細(xì)胞可直接作為實(shí)驗(yàn)樣本，用于體外培養(yǎng)、藥物處理、分子檢測(cè)、免疫實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞分化誘導(dǎo)、肺損傷模型構(gòu)建等，適配的實(shí)驗(yàn)樣本形式包括細(xì)胞懸液、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞爬片、細(xì)胞涂片等，可滿足肺部疾病機(jī)制研究、藥物篩選、肺泡表面活性物質(zhì)代謝研究、肺損傷修復(fù)機(jī)制研究等不同實(shí)驗(yàn)檢測(cè)需求。

備注：（具體樣本處理方法請(qǐng)參考產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)）

儲(chǔ)存與注意事項(xiàng)

（一）儲(chǔ)存條件

1. 復(fù)蘇狀態(tài)細(xì)胞：收到細(xì)胞后，立即置于37℃、5%CO?恒溫培養(yǎng)箱中靜置2-3小時(shí)，待細(xì)胞貼壁后更換新鮮培養(yǎng)基，短期儲(chǔ)存（1-7天）可維持該培養(yǎng)條件，避免頻繁移動(dòng)培養(yǎng)瓶，避免溫度波動(dòng)影響細(xì)胞貼壁及活性；2. 凍存狀態(tài)細(xì)胞：采用液氮（-196℃）長(zhǎng)期儲(chǔ)存，凍存液配方為30%基礎(chǔ)培養(yǎng)基（DMEM/F12優(yōu)先）+60%胎牛血清+10%DMSO，分裝至凍存管后經(jīng)程序降溫（4℃30分鐘→-20℃1小時(shí)→-80℃過(guò)夜→液氮）處理，避免反復(fù)凍融，凍存液可添加適量細(xì)胞保護(hù)劑，提升細(xì)胞復(fù)蘇存活率；3. 未開(kāi)封配套試劑（如凍存液、復(fù)蘇輔助試劑、專用培養(yǎng)基）：2-8℃冷藏避光保存，有效期內(nèi)使用，嚴(yán)禁冷凍，專用培養(yǎng)基建議現(xiàn)配現(xiàn)用。

（二）注意事項(xiàng)

1. 本產(chǎn)品僅供科研使用，不可用于人類或動(dòng)物臨床診斷、治療，非藥用、非食用，操作需在BSL-2生物安全實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作規(guī)范及細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)預(yù)防措施，避免細(xì)胞污染及實(shí)驗(yàn)人員暴露風(fēng)險(xiǎn)；2. 細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，實(shí)驗(yàn)器材需徹di滅菌，移液器吸頭一次性使用，避免交叉污染，建議使用專用培養(yǎng)基及血清，不可擅自更換培養(yǎng)基體系或血清比例，定期觀察細(xì)胞貼壁情況、形態(tài)及生長(zhǎng)狀態(tài)，及時(shí)換液、傳代，避免細(xì)胞過(guò)度密集影響活性及功能；3. 收到細(xì)胞后需立即檢查，若出現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、漏液、培養(yǎng)液渾濁、細(xì)胞脫落嚴(yán)重或細(xì)胞活力異常，及時(shí)與廠家聯(lián)系反饋；4. 細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需快速解凍（37℃水浴5-8分鐘，輕輕搖晃凍存管至wan全融化），避免DMSO損傷細(xì)胞，復(fù)蘇后及時(shí)離心洗滌（1000rpm，5分鐘），去除凍存液后接種培養(yǎng)，培養(yǎng)過(guò)夜后檢查細(xì)胞貼壁及活性；5. 該細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，傳代時(shí)需用yi酶消化（消化時(shí)間控制在1-2分鐘，避免過(guò)度消化），消化后及時(shí)終止，輕柔吹打細(xì)胞，避免機(jī)械損傷影響細(xì)胞功能；6. 定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行鑒定，包括特異性標(biāo)志物表達(dá)、細(xì)胞純度、污染情況及功能驗(yàn)證（表面活性物質(zhì)分泌），防止細(xì)胞變異、污染或功能丟失；7. 凍存細(xì)胞復(fù)蘇后建議盡快使用，未使用的細(xì)胞需按規(guī)范凍存，避免反復(fù)凍融影響細(xì)胞活性及生物學(xué)功能，原代細(xì)胞不建議長(zhǎng)期傳代，建議在3-5代內(nèi)完成實(shí)驗(yàn)。