C57小鼠黑色素瘤瘤株
C57小鼠黑色素瘤瘤株核心產品為從C57BL/6小鼠黑色素瘤組織中分離、永生化構建的穩定細胞株,核心提供B16、B16-F10兩種常用亞型(B16為基礎亞型,B16-F10侵襲轉移能力更強),可提供不同傳代次數的細胞系,配套提供細胞培養說明書、細胞凍存液、復蘇液及質量檢測報告(含細胞純度、黑色素標志物鑒定、支原體檢測、相關基因表達檢測等),同時提供細胞培養技術支持及定制化實驗服務。該瘤株采用胰dan白酶消化、密度梯度離心等成熟分離技術,從C57BL/6小鼠黑色素瘤組織中去除正常黑色素細胞、成纖維細胞等雜細胞,通過黑色素瘤特異性標志物(如MAGE-A3、MART1、PAX3、酪an酸酶)鑒定,確保細胞純度≥98%,無支原體、細菌、真菌污染,細胞活性≥90%。該瘤株適配常規貼壁細胞培養條件,可穩定傳代,生物學特性穩定,保留其惡性增殖、黑色素分泌及侵襲轉移潛能,廣泛應用于黑色素瘤發病機制研究、腫瘤侵襲轉移實驗、靶向藥物篩選、免yi治療相關實驗及基因功能驗證等科研場景,依托C57BL/6小鼠補體活性高、干擾素產量較高、易誘發免疫耐受性的遺傳特性,適配腫瘤學、免疫學相關研究,為腫瘤學、分子生物學、免疫學等相關領域的科研探索、藥物研發提供核心細胞模型,適配科研院所、生物醫藥企業、高校實驗室及各級醫院腫瘤科科研部門。
分離與培養原理
該瘤株的分離與培養核心基于腫瘤組織消化分離及永生化技術,結合C57小鼠黑色素瘤細胞貼壁生長、惡性增殖的生物學特性,實現細胞的精準分離與體外穩定培養,具體核心步驟分為分離和培養兩部分:一是細胞分離原理,選取接種黑色素瘤細胞后形成腫瘤的健康C57BL/6小鼠,無菌操作下取出腫瘤組織,碎至1mm3大小的組織塊,加入0.25%胰dan白酶-EDTA消化液(B16-F10可選用不含EDTA的yi酶),37℃水浴消化20-30分鐘,期間每5-10分鐘搖動一次,消化完成后加入含胎牛血清的培養基終止消化,用PBS漂洗2-3次,800r/min離心5分鐘棄去上清液,通過密度梯度離心去除雜細胞,利用黑色素瘤特異性標志物篩選,獲得高純度該瘤株;二是細胞培養原理,將分離獲得的該瘤株接種于培養瓶中,使用含10%胎牛血清的DMEM培養基,添加青mei素、鏈mei素雙抗,置于37℃、5% CO?、飽和濕度的培養箱中培養,培養基可維持細胞的惡性增殖活力,同時保留其黑色素分泌、侵襲轉移及相關基因表達特性,定期更換培養基(每2-3天一次),待細胞融合度達80%-90%時進行傳代,確保細胞正常生長,避免細胞老化或凋亡。此外,所有分離培養的該瘤株均需經過細胞活性檢測、純度鑒定、黑色素標志物檢測及污染檢測,確保細胞的穩定性和可靠性,為后續科研實驗提供優質細胞模型,同時可通過優化培養體系,模擬體內黑色素瘤微環境,提升細胞體外培養的穩定性。
產品特點
該瘤株以“純度高、活性強、特征典型、適配性廣"為核心,貼合C57小鼠遺傳背景及黑色素瘤相關研究的實際科研需求,核心特點突出,匹配科研實驗對腫瘤細胞模型的核心訴求。一是遺傳背景均一,源自近交系C57BL/6小鼠,基因純合度高,個體差異小,可顯著提升實驗數據的可重復性與可比性,同時繼承該品系補體活性高、干擾素產量較高、易誘發免疫耐受性的特性,適配免yi治療相關研究;二是細胞純度高、無污染,細胞純度≥98%,經黑色素瘤特異性標志物鑒定及嚴格污染檢測,無支原體、細菌、真菌及雜細胞污染,確保實驗結果的準確性;三是核心特征典型,不同亞型各具特色,B16瘤株惡性度適中,適用于基礎機制研究,B16-F10瘤株侵襲轉移能力強,適用于轉移相關實驗,均具備黑色素分泌能力,可通過黑色素標志物快速鑒定,同時存在蛋白4.1B表達缺失等典型分子特征,可精準模擬臨床黑色素瘤的病理狀態;四是生物學特性穩定,細胞生長狀態良好,貼壁性強、增殖迅速,可穩定傳代30代以上,傳代過程中惡性表型、黑色素分泌及侵襲轉移特性不丟失,符合科研實驗對數據可重復性的核心要求;五是適配性強,可適配體外常規貼壁細胞培養、MTT增殖實驗、Transwell侵襲/遷移實驗、平板細胞克隆形成實驗、Western blotting檢測、免疫熒光染色、基因轉染、藥物敏感性實驗等多種實驗場景,同時可用于C57BL/6小鼠體內移植實驗,構建皮下移植瘤或肺轉移模型,助力體內外協同研究;六是操作便捷,提供完整的細胞復蘇、培養、凍存說明書,細胞復蘇成活率高(≥90%),無需復雜實驗設備,常規貼壁細胞培養條件即可滿足生長需求,適配各類實驗室操作,同時提供黑色素標志物檢測、基因表達驗證等專屬技術指導。
適用實驗場景
該瘤株專為C57小鼠背景黑色素瘤相關科研實驗設計,適配多種體外及體內實驗場景,核心應用包括:一是黑色素瘤發病機制研究,利用該瘤株探究黑色素瘤發生發展的分子機制,分析蛋白4.1家族、MAGE-A3、MART1等相關基因及信號通路的作用,明確黑色素瘤惡性增殖、侵襲轉移的調控機制;二是腫瘤侵襲轉移研究,利用B16-F10亞型的高轉移特性,開展Transwell、尾靜脈移植肺轉移等實驗,探究黑色素瘤轉移的分子路徑,同時可用于評估高強度聚焦超聲(HIFU)等治療手段對腫瘤轉移的抑制效果;三是藥物篩選與藥效評估,將該瘤株用于黑色素瘤靶向藥物、hua療藥物、免疫調節劑的篩選,評估藥物對細胞增殖、凋亡、侵襲的抑制效果,同時可用于評估藥物對腫瘤細胞黑色素分泌的影響,為藥物研發提供可靠的篩選模型;四是免yi治療相關研究,依托C57BL/6小鼠的免疫特性,將該瘤株用于免疫檢查點抑制劑(如PD-1/PD-L1抑制劑)、CAR-T細胞治療、CSC-DC疫苗等相關實驗,評估免yi治療對黑色素瘤細胞的殺傷效果,探究IL-12等細胞因子對腫瘤免疫微環境的調控作用;五是基因功能研究,通過該瘤株開展基因過表達、沉默實驗,探究相關基因(如蛋白4.1B、IL-12)對黑色素瘤細胞增殖、凋亡、侵襲的影響,明確其抑癌或促癌作用;六是分子機制驗證實驗,可用于Western blotting、Real-time PCR、流式細胞術等實驗,驗證黑色素瘤相關基因及信號通路的調控機制,為相關研究提供分子層面的數據支撐。該瘤株適配科研院所、生物醫藥企業、高校實驗室及各級醫院腫瘤科科研部門,助力相關科研實驗的順利開展。
備注:(具體細胞分離、培養及實驗操作方法請參考產品說明書)
儲存與注意事項
儲存方面,該瘤株凍存狀態下需置于-80℃超低溫冰箱或液氮中保存,有效期為12個月,凍存時需使用含5-10%DMSO的配套凍存液,采用梯度降溫法凍存(-1~-2℃/min降溫至-25℃以下,再以-5~-10℃/min降溫至-100℃后浸入液氮),避免細胞損傷;復蘇時需快速解凍(37℃水浴1-2分鐘),解凍后立即用70%酒精消毒凍存管,避免進水污染,復蘇后需立即接種至培養瓶,加入預熱的專用培養基,置于37℃、5% CO?、飽和濕度的培養箱中培養,復蘇后24小時內避免更換培養基,確保細胞適應環境、穩定貼壁;常規培養狀態下,細胞需置于37℃、5% CO?培養箱中,使用含10%胎牛血清的DMEM培養基培養,定期更換培養基(每2-3天一次),待細胞融合度達80%-90%時傳代,B16傳代可選用含EDTA的yi酶,B16-F10建議選用不含EDTA的yi酶,避免細胞損傷,傳代比例建議為1:3-1:5,避免細胞過度融合導致老化。注意事項包括:產品僅供科研使用,不用于臨床治療診斷;細胞復蘇時需快速解凍,避免反復凍融,解凍后及時接種,防止細胞活力下降,凍存管取出時需注意防護,避免凍傷;培養過程中需嚴格遵循無菌操作原則,禁止共用培養耗材,避免細胞污染,若發生污染切勿進行半量換液,無菌操作是細胞培養成功的關鍵;細胞傳代時需控制消化時間(3-5分鐘),避免過度消化導致細胞貼壁能力下降,傳代時輕柔吹打,避免劇烈震蕩損傷細胞;檢測過程中(如Western blotting、流式細胞術),需嚴格遵循實驗操作規范,確保黑色素標志物及相關分子檢測結果準確;過期細胞及污染細胞嚴禁使用,詳細安全信息請參照產品SDS文件;運輸過程中需采用干冰運輸,避免高溫、劇烈震蕩,確保細胞活力,運輸后需及時復蘇或轉移至對應儲存環境。
訂購信息
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以上信息僅供參考,具體請已產品說明書為準。